پاسخ به سوال رسیده

پاسخ به سوال رسیده

1) علل دنباله دار شدن یک پیک در کروماتوگرام چیه؟ 

علت های دنباله دار شدن داستان طویل و درازی دارد اگر موردی به این مشکل خوردید با ذکر جزئیات کار برام بفرستید تا در اسرع وقت نسخه رفع مشکل رو براتون تهیه کنم. اما به طور کلی وجود دنباله یا tailing و حتی Fronting در پیک های کروماتوگرافی باعث بهم خوردن تقارن پیک و عدم هماهنگی در انتگرال گیری موثر سیستم و در نتیجه خطای موثر مثبت یا منفی از نوع خطاهای سیستماتیک دستگاهی می شود. کلیت قضیه مربوط می شود به اینکه پروفایل غلظتی در ستون به اندازه کافی تجمیع نمیشود این کشیدگی در پروفایل در ابتدا یا انتهای پیک باعث ایجاد کشیدگی در اول یا آخر یا هردو می شود. اولین عامل ظرفیت نمونه گذاری ستون است اگر همه چیز عالی باشد. برای فهم این قضیه مقدار تزریق را یکدهم کنید آیا بازم کشیدگی وجود دارد آیا مقدار آن کم شده است؟ اگر اولی مثبت است یعنی باید علت چیزی غیر از غلظت آنالیت تان باشد در ضمن من دتکتور شما را UV-VIS در نظر گرفته ام بعد از آن کثیف بودن گاردتان را بررسی کنید اگر گارد خیلی کثیف باشد باید در همه پیک ها این کشیدگی اتفاق بیوفتد سوم سراغ شویش و فاز متحرک تان بروید آیا شویش شما به اندازه کافی قدرتمند است که بتواند تمامی ترکیبات یکسان را یکجا جمع کند. عواملی متعددی روی قدرت شویش تاثیر میگذارند مانند pH قدرت یونی میزان حلال آلی و نوع بافر چون هیچ اطلاعاتی به من ندادید نمیتونم اظهار نظر کنم . در اخر ممکن است ستون تان از نوع پایانه نپوشیده باشد که مخصوصا در ترکیبات بازی دچار کشیدگی بیشتر می شود مقدار سیلانول های آزاد در فاز ساکن یکی از متهمان اصلی در این مورد هستند با اضافه کردن مقداری دی یا تری اتیل آمین شاید بتوانید جلو این قضیه را بگیرید اگر عمر ستونتان کم است شاید مقداری بیش از حد یون فلزی در ستونتان گیر افتاده باشد بنابراین با محلول اتیلن دی آمین تترا استیک اسید 0.01 مولار شستشو لازم داشته باشد و حتی ممکن است ستون آسیب دیده باشد بهر حال 
2)آیا هرپیکی که سطح زیر آن بیشتراست نشان دهنده غلظت بیشترنمونه است؟

خیر سطح زیر هر پیک وابسته به پاسخ دتکتور به آنالیت است اگر فرض کنیم دتکتور شما uv-vis باشد قانون بیر- لامبرت میزان جذب گونه در طول موج مورد نظر را نشان می دهد که جذب نیز به ضریب جذب مولی و غلظت وابسته است . هر چه جذب بیشتر باشد میزان پاسخ و سطح زیر پیک بیشتر است اما جذب تنها به غلظت وابسته نیست برای دو ترکیب متفاوت با غلظت یکسانی آنکه ضریب جذب مولی بیشتری دارد جذب بیشتری نیز دارد. به طور خلاصه سطح زیر پیک در یک کروماتوگرام به ضریب پاسخ گونه از دتکتور بستگی دارد نه الزاما غلظت آن. 

یا علی