انتخاب فاز متحرک در HPLC

برای بدست آوردن ^/k از رابطه (t_m)/(t_R-t_m) استفاده می کنیم.

قطبیت مخلوط حلالها هم توسط رابطه زیر بدست می آید:

P=X_AP_A+X_BP_B+X_CP_C+X_DP_D

اگر قطبیت فاز متحرک تغییر کند ^/k حالت دوم نسبت به ^/k حالت اول به نوع ستون وابسته است . در فاز نرمال خواهیم داشت.

log(K^/₂/K^/₂)=0.5*(P₁-P₂)

و اما در فاز معکوس رابطه به صورت زیر تغییر خواهد کرد

log(K^/₂/K^/₂)=0.5*(P₂-P₁)

قطبیت هگزان برابر 0.1 تولوئن مساوی 2.4 و اتانول 4.3 متانول 0.1 استونیتریل 5.1 THF برابر با 4 و آب 10.2 است.

مثال:

اگر برای آنالیز ترکیبی از 70 درصد متانول و بقیه آب استفاده شود زمان بازداری 31.3 در ستون RP بدست می آید اگر زمان بازداری فاز متحرک 0.44 دقیقه باشد برای رسیدن به فاکتور ظرفیت 5 چه درصدی متانول  باید استفاده کرد.   پاسخ = 73 درصد