Column Abuse

پاسخ به سوال رسیده

یه سوال درباره ستون HPLC داشتم میخواستم بدونم اگر به جای حلال حدود چند دقیقه هوا وارد ستون بشه (مثل موردی که حلال تموم شده و ما متوجه نشیم و هوا وارد ستون بشه) به ستون لطمه میزنه؟

در ستون های جدید  HPLC حساسیت پایه های سیلیسی به اکسیژن کمتر شده است. البته در ابتدای استفاده در حضور مقدار زیاد هوا مثلا کار کردن دستگاه بدون حلال برای یک شبانه روز در صورتی که ستون بدون آلودگی یونهای فلزی و ذرات باقیمانده از آنالیز داشته باشد مقدار آسیب قابل اغماض بوده ولی در ستون های کار کرده امکان آسیب جدی و تولید حفره های و عدم تکرار پذیری وجود دارد. ولی در هر حالت عبور هوا در حد یک یا دو ساعت بدون حلال در غیاب مواد اکسید شونده مانند کاتیونهای فلزی و به شرط تمیز بودن فاز ساکن مشکل جدی ایجاد نمیکند زیرا به اندازه کافی بخارات اشباع شده از حلال در فاز ساکن وجود دارد . البته تاثیر هوا بر پمپ کاملا به نوع آن بستگی دارد و تکرار پذیری و کارایی آن را به مخاطره می اندازد

توجه داشته باشید که برخی از دستگاههای HPLC در صورت اتمام حلال  اتوماتیک خاموش می شوند و نیز

در صورت عدم استفاده از ستون  باید آنرا به صورت end-capped و پر شده از حلال آلی مناسب نگه داری کنید.

در صورتی که ستون بدون حلال برای مدتی استفاده شده توصیه می کنم ابتدا از درست کار کردن پمپ مطمئن شده و ستون را از مدار خارج کرده تا پمپ به حالت پایدار خود برسد و سپس  ستون را برعکس بسته و حلالی که قبلا از داخل آن عبور می کرده را با فلوریت یک دهم میلی لیتر بر دقیقه از آن عبور دهید و اجازه بدهید تا 20 برابر حجم ستون حلال از آن عبور کند. و دوباره ستون را در جهت درست بسته و با همان فلو مدتی حلال را از داخل آن عبور دهید. در ضمن با محاسبه حجم ستون قبل و بعد از این واقعه می توانید به توانایی ستون تان پی ببرید.

V_c = π x (diameter / 2)² x length x 0.68 

(keep all dimensions in mm and the result will be in μl)

بنابراین برای چند دقیقه ورود هوا به دلیل اشباع بودن فضای داخلی حفره های فاز ساکن ، مشکل جدی برای ستون ایجاد نخواهد شد./

یا علی

م. حجتی